
标题:CF633 OVA,CF633 Ovalbumin,CF633标记鸡卵白蛋白,Ovalbumin,CF633 labeled
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CF680 OVA,CF680 Ovalbumin,CF680标记鸡卵白蛋白,Ovalbumin, CF680 labeled
一、基本定义
CF640R标记鸡卵白蛋白
定义:CF640R是一种远红外荧光染料(激发波长642nm,发射波长662nm),通过共价键(如NHS酯与赖氨酸残基反应)偶联至鸡卵白蛋白(OVA,分子量约45kDa)。
特性:高亮度、光稳定性强,减少生物样本自发荧光干扰,适用于细胞膜糖蛋白(如唾液酸)的特异性标记及多色成像(如与CF488A、CF594联用)。
应用场景:免疫荧光、组织切片染色、Western Blot及活细胞成像(如神经元发育动态观察)。
展开剩余81%CF633标记鸡卵白蛋白
定义:CF633为远红色荧光染料(激发波长630nm,发射波长650nm),通过类似化学偶联方式结合OVA。
特性:高特异性和亲和力(如与霍乱毒素B亚基CTB结合GM1糖脂),光稳定性优于Alexa Fluor 647,适用于多色荧光实验。
应用场景:神经元追踪、脂筏结构研究、免疫学检测(如GM1表达水平分析)。
CF680标记鸡卵白蛋白
定义:CF680属于近红外荧光染料(激发波长680nm,发射波长701nm),通过共价键偶联OVA,形成高穿透性标记物。
特性:穿透深度可达数毫米,光稳定性优异,耐pH 4-10环境,适用于活体成像及深层组织检测。
应用场景:活体动物成像、肿瘤靶向示踪、血管标记及溶酶体/凋亡复合检测。
二、共同优势
低背景高信噪比:三者均位于远红光区(650–702 nm),相较于 FITC、TRITC 等传统染料,细胞和组织自发荧光更弱,背景噪声低。
光稳定性强:相较于传统有机染料,CF 系列染料抗光漂白性能更好,适合长时间曝光和多次观察。
高亮度:由于摩尔消光系数大和量子产率高,这三种染料都能提供强烈的荧光信号,检测灵敏度高。
生物相容性好:通过 NHS-酯与 OVA 偶联后,蛋白质的结构基本保持完整,生物学功能(如抗原性)未被破坏,可用于活体实验。
三、使用场景常见问题及解决方法
荧光淬灭与信号衰减
原因:储存不当(反复冻融/光照)、pH偏离(如CF640R在pH<4或>10时失活)、溶剂残留(如叠氮钠浓度过高)。
解决:避光-20℃分装保存;调节缓冲液pH至7.0-8.5;使用高纯度PBS/HEPES稀释,避免含淬灭剂的溶剂。
非特异性结合与背景噪声
原因:游离染料残留、蛋白聚集、未封闭非特异性位点。
解决:标记后透析或凝胶过滤纯化;高速离心去除聚集体;使用BSA/血清封闭样本。
蛋白活性损失与标记度异常
原因:染料与蛋白比例过高(DOL>5)、反应条件不当(温度/pH极端)。
解决:优化摩尔比(DOL 2-5);控制反应在弱碱性(pH 7.5-8.5)、室温或4℃进行。
多色实验串色与光谱重叠
原因:染料发射光谱重叠(如CF640R与Alexa Fluor 647)。
解决:选择光谱间隔大的染料(如CF640R与CF594);使用光谱解混软件或窄带滤光片。
四、新研博美目录列表:
Cyanine3B mal
Cyanine3B NHS ester
Cy3B NHS ester
5-TAMRA azide
biotin-NHS ester,biotin NHS
DSPE-PEG3400-hydrazide
TAMRA NHS ester
5(6)-TAMRA NHS Ester
TAMRA-PEG4-acid
TAMRA-Azide-PEG-Desthiobiotin
Methoxy-PEG-SS-Octadecanol
Methoxy-PEG-SS-Octadecanol
Methoxy-PEG-Succinyl Chloride
Biotin-PEG3-COOH,252881-76-8
Methoxy-PEG-Thioacetic Acid
HO-PEG-Ornithine,Hydroxyl-PEG-Ornithine
MA-PEG-Poly-Sarcosines,Methacrylate-PEG-Poly-Sarcosines
温馨提示:
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